所謂分子生物實(shí)驗(yàn)室,是一種對(duì)分子生物進(jìn)行基本分析的實(shí)驗(yàn)室。其實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目主要包括六類,即:動(dòng)植物與微生物DNA的提取與鑒定、動(dòng)物組織的RNA的提取與鑒定、質(zhì)粒DNA的提取與鑒定、PCR擴(kuò)增、分子文庫的構(gòu)建。 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室作實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中的特殊實(shí)驗(yàn)室類型,設(shè)計(jì)規(guī)劃布局需嚴(yán)格按照《微生物和生物安全通用準(zhǔn)則》來進(jìn)行建設(shè)規(guī)劃。針對(duì)此專業(yè)類的實(shí)驗(yàn)室,
CEIDI西遞以其規(guī)劃區(qū)域及各區(qū)域內(nèi)通風(fēng)系統(tǒng)為內(nèi)容做相關(guān)科普。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室通常會(huì)設(shè)置的四大區(qū)域,即為試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。
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分子生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)裝修 | CEIDI西遞
試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)
主要是作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備,試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū),不得經(jīng)過其它區(qū)域。試劑原材料需貯存在本區(qū)內(nèi),并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對(duì)氣流壓力的控制,本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。
標(biāo)本制備區(qū)
作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)DNA的合成。其壓力梯度要求為相對(duì)于臨近區(qū)域?yàn)檎龎海员苊鈴泥徑鼌^(qū)域進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外,由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染,所以應(yīng)避免在本區(qū)域內(nèi)不必要的走動(dòng)。
擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)
主要是DNA擴(kuò)增,已制備的DNA模板和合成的DNA和主反應(yīng)混合液,制備成反應(yīng)混合液等,也可以在本區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。在PCR測(cè)定中,通常在擴(kuò)增后須打開反應(yīng)管。因此擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性,因此本區(qū)的壓力梯度要求為,相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免氣溶膠從本區(qū)域漏出。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)
主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定,如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè),此區(qū)域可不設(shè)。應(yīng)注意擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源,因此對(duì)本區(qū)的壓力梯度的要求為,相對(duì)于臨近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)域擴(kuò)散至其它區(qū)域。
分子生物實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域要根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器,如超凈工作臺(tái)、生物柜、離心機(jī)、加樣器、梯度基因擴(kuò)增儀、降落基因擴(kuò)增儀、凝膠成像系統(tǒng)、紫外/可見分光光度計(jì)、垂直電泳系統(tǒng)、水平穩(wěn)定穩(wěn)壓電泳系統(tǒng)、超純水系統(tǒng)、高速冷凍離心機(jī)、恒溫?fù)u床等儀器設(shè)備。如果是食品類分子生物實(shí)驗(yàn)室則按照GBT 27403-2008(實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范-食品分子生物學(xué)檢測(cè))要求建立了規(guī)范化的操作程序,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。其他分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室都依據(jù)相關(guān)規(guī)范建立操作程序即可。
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